細胞灌流培養與產物連續收獲
應用場景:
在哺乳動物細胞(如CHO細胞)培養中,通過TFF實現細胞截留,延長培養周期并提高產物(如抗體、病毒載體)滴度。
操作流程:
- ?系統配置:使用中空纖維膜包(如Repligen XCell ATF系統),膜孔徑0.2 μm,截留細胞但允許代謝廢物和產物通過。
- ?灌流控制:蠕動泵以低流速(如10 mL/min)循環培養液,維持細胞密度至1×10^7 cells/mL。
- ?產物收集:濾液中含有目標產物(如抗體),每日取樣監測濃度并定期收集。
- ?營養補充:根據消耗速率持續補加新鮮培養基,維持細胞活力。
優勢:
- 培養周期可延長至30天以上,抗體產量提高3~5倍。
- 避免傳統批次培養的頻繁換液操作,降低污染風險。
注意事項:
- 需優化剪切力(泵速)以防止細胞損傷(CHO細胞通常耐受剪切力<50 dyn/cm²)。
- 定期監測膜堵塞情況(通過TMP升高判斷),必要時進行反向沖洗(Backflush)。